RT-qPCR mit Sonden .
Unser primaQUANT 1-Step RT-qPCR Master Mix für Sonden ist perfekt für sondenbasierte RT-qPCR Assays wie Taqman®, Beacons und MGBs. Alle Enzyme sowohl für die Reverse Transkription als auch für die qPCR sind im Master Mix enthalten, inklusive dNTPs und MgCl₂.
Starten Sie Ihre qPCR direkt mit RNA – keine separate cDNA Synthese notwendig.
Sie müssen nur noch Primer, Sonden und Template-RNA zugeben. Durch das optimierte Puffersystem ist eine schnelle Kinetik und zielgerichtete Amplifikation auch bei schwierigen Templates garantiert.
Hard Facts .
- Exzellente Sensitivität < 10 fg RNA
- cDNA Synthese und qPCR in einer Reaktion
- Hot-Start-Polymerase
- Ultra-Fast: RT-qPCR in < 35 Minuten
- Sicheres Handling durch blaue Färbung
- One-Tube Format - 1 Master Mix
- Multiplexing für > 6 Targets
- Entwickelt & Hergestellt in Deutschland
Anwendungen .
Der primaQUANT 1 STEP RT-qPCR Master Mix eignet sich hervorragend zur Bestimmung der Gen-Expression. Durch die perfekt abgestimmte Kombination von Reverser Transkriptase und qPCR in diesem Master Mix bestimmen Sie die Expression von Genen schnell und ohne separate cDNA-Synthese.
Bei der Diagnostik von pathogenen RNA-Viren mittels qPCR ist die Umschreibung der Pathogen-RNA in cDNA notwendig. Mit dem primaQUANT 1Step RT-qPCR Master Mix erledigen Sie cDNA-Synthese und qPCR-Analyse in einem Schritt. Damit sind Hochdurchsatz-Analysen und Automation problemlos möglich.
Features .
RT-qPCR in unter 35 Minuten .
In den primaQUANT 1STEP RT-qPCR Master Mixen kombinieren wir optimierte Reverse Transkriptasen mit einer extrem schnellen DNA-Polymerase. Damit kann eine komplette RT-qPCR (Umschreibung von RNA in cDNA und anschließende qPCR) je nach qPCR-Gerät in weniger als 35 Minuten durchgeführt werden.
Damit sparen Sie insbesondere bei der Diagnostik oder größeren Probenzahlen wertvolle Zeit und Kapazität.
Selbstverständlich können Sie aber auch Ihr bisheriges RT-qPCR Protokoll weiterhin verwenden.
1-Step RT-qPCR Master Mix für Sonden .
Erhältlich mit ROX oder ohne ROX – passend für alle qPCR Geräte.
Downloads .
ROX Kompatibilitätsliste
| Hersteller | qPCR Gerät | ROX notwendig? |
|---|---|---|
| Applied Biosystems / Thermo Fischer | StepOne™ Real-Time PCR System | Ja (high ROX) |
| StepOnePlus™ Real-Time PCR System | Ja (high ROX) | |
| 7500 Real-Time PCR System | Ja | |
| 7500 Fast Real-Time PCR System | Ja | |
| 7500 Fast Dx Real-Time PCR Instrument | Ja | |
| 7500 Real-Time PCR System for Human Identification | Ja | |
| 7300 Real-Time PCR System | Ja (high ROX) | |
| Viia™ 7 Real-Time PCR System | Ja | |
| 7900HT Fast Real-Time PCR System | Ja (high ROX) | |
| OpenArray® Real-Time PCR Platform | Ja (high ROX) | |
| PRISM® 7000 Sequencing Detection System | Ja (high ROX) | |
| PRISM® 7700 Sequencing Detection System | Ja (high ROX) | |
| PRISM® 7900 Sequencing Detection System | Ja (high ROX) | |
| Gene Amp 5700 | Ja (high ROX) | |
| Quantstudio™ 3 / 3 FAST | Ja | |
| Quantstudio™ 5 / 5 FAST | Ja | |
| Quantstudio™ 6 | Ja | |
| Quantstudio™ 7 | Ja | |
| Quantstudio™ 12 | Ja | |
| QuantStudio™ 12K Flex system | Ja | |
| Bioneer | Exicycler™96 | Nein (optional) |
| Exicycler™384 | Nein (optional) | |
| Biorad | CFX96™ Real-Time PCR Detection System | Nein |
| CFX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System | Nein | |
| CFX384 Touch™ Real-Time PCR Detection System | Nein | |
| CFX Opus 96 Real-Time PCR System | Nein | |
| CFX Opus 384 Real-Time PCR System | Nein | |
| CFX Connect™ Real-Time PCR Detection System | Nein | |
| iQ5 Real-Time PCR Detection System | Nein | |
| MiniOpticon™ Real-Time PCR Detection System | Nein | |
| Opticon 2 – Continuous Fluorescence Detection System | Nein | |
| Chromo4™ Four-Color Real-Time Detector | Nein | |
| Bioron | RealLine Cycler 48-4 | Nein (optional) |
| RealLine Cycler 48-5 | Nein (optional) | |
| RealLine Cycler 96-4 | Nein (optional) | |
| RealLine Cycler 96-5 | Nein (optional) | |
| DNA Technology | Dtlite | Nein (optional) |
| Dtprime | Nein (optional) | |
| Eppendorf | Mastercycler® ep realplex 4, Real-Time Thermal Cycler | Nein |
| Mastercycler® ep realplex 4s, Real-Time Thermal Cycler | Nein | |
| Mastercycler® ep realplex, Real-Time Thermal Cycler | Nein | |
| Mastercycler® ep realplex s, Real-Time Thermal Cycler | Nein | |
| Mastercycler Nexus | Nein | |
| Mastercycler Nexus gradient | Nein | |
| Mastercycler Pro | Nein | |
| Mastercycler Pro S | Nein | |
| Mastercycler Pro 384 | Nein | |
| Roche | LightCycler® 96 System | Nein |
| LightCycler® 480 System | Nein | |
| LightCycler® 2.0 Instrument | Nein | |
| LightCycler® 1.5 Instrument | Nein | |
| LightCycler® 1536 System | Nein | |
| LightCycler® Nano System | Nein | |
| Analytik Jena | qTower | Ja |
| qTower 2.0 | Ja | |
| qTower 2.2 | Ja | |
| qTower 3 | Ja | |
| qTower 3 84 | Ja | |
| Stratagene / Agilent | AriaMx Real-time PCR System | Nein |
| Mx3000P® qPCR System | Ja | |
| Mx3005P® qPCR System | Ja | |
| Mx4000® qPCR System | Ja | |
| Qiagen | Rotor-Gene™ Q | Ja |
| Rotor-Gene™ 6000 | Ja | |
| Quantabio | Q | Nein (optional) |
Protokoll
Zusammensetzung
| Komponente | Stock Konzentration | 20 µl Reaktion | 10 µl Reaktion | Finale Konzentration |
|---|---|---|---|---|
| primaQUANT 1STEP Master Mix | 2x | 10 µl | 5 µl | 1 x |
| Forward Primer | 8 µM | 1 µl | 0,5 µl | 400 nm (100 – 600 nM empfohlen) |
| Reverse Primer | 8 µM | 1 µl | 0,5 µl | 400 nM (100 – 600 nM empfohlen) |
| Probe / Sonde | 8 µM | 1 µl | 0,5 µl | 400 nM (100 – 600 nM empfohlen) |
| Template RNA | 10 ng/µl | 2 µl | 1 µl | 0,1 – 100 ng/Reaktion |
| Steriles Wasser | – | 5 µl | 2,5 µl | – |
Standard Protokoll
3-Step
| Schritt | Zeit | Temperatur | |
|---|---|---|---|
| Reverse Transkription | 10 Minuten | 50°C | |
| Initiale Denaturierung | 3 Minuten | 92°C – 95°C | |
| 25 – 45 Zyklen | Denaturierung | 5 Sekunden | 92°C – 95°C |
| Annealing | 5 Sekunden | 60°C – abhängig von den verwendeten Primern | |
| Extension | 5-10 Sekunden | 72°C |
2-Step
| Schritt | Zeit | Temperatur | |
|---|---|---|---|
| Reverse Transkription | 10 Minuten | 50 °C | |
| Initiale Denaturierung | 3 Minuten | 92 °C – 95°C | |
| 25 – 45 Zyklen | Denaturierung | 5 Sekunden | 92 °C – 95°C |
| Kombiniertes Annealing/Extension | 10 Sekunden | 60 °C – abhängig von den verwendeten Primern |
Ultra-FAST Protokoll
3-Step
| Schritt | Zeit | Temperatur | |
|---|---|---|---|
| Reverse Transkription | 5 Minuten | 50°C | |
| Initiale Denaturierung | 60 Sekunden | 92°C – 95°C | |
| 25 – 45 Zyklen | Denaturierung | 1 Sekunde | 92°C – 95°C |
| Annealing | 1 Sekunde | 60°C – abhängig von den verwendeten Primern | |
| Elongation | 1-5 Sekunden | 72°C |