Reverse Transkription und qPCR mit SYBR® Green .

Unser primaQUANT 1STEP CYBR RT-qPCR Master Mix für SYBR® Green RT-qPCR kombiniert die cDNA-Synthese mit einer quantitativen PCR. Das Produkt enthält alle Enzyme sowohl für die Reverse Transkription als auch für die qPCR, inklusive dNTPs und MgCl₂. Sie müssen nur noch Primer und Template-RNA hinzufügen. Das optimierte Puffersystem sorgt für eine schnelle Kinetik und eine zielgerichtete Amplifikation, insbesondere bei schwierigen Templates.

Hard Facts .

Exzellente Sensitivität
cDNA Synthese und qPCR in einer Reaktion
Ultra-Fast: RT-qPCR in < 35 Minuten
sicheres Handling durch blaue Färbung
One-Tube Format
Made in Germany

Anwendungen .

Genexpression / RNA Expression in einem Schritt

Mit dem primaQUANT 1 STEP RT-qPCR Master Mix erledigen Sie Reverse Transkription und qPCR in einem Schritt. So lässt sich die Genexpression über das RNA Level schnell und ohne zusätzlichen Aufwand bestimmen.

Pathogendetektion

Zur Diagnostik von pathogenen RNA-Viren muss die Pathogen-RNA in cDNA umgeschrieben werden. Mit dem primaQUANT 1Step RT-qPCR Master Mix erledigen Sie die Reverse Transkription und qPCR in einem Rutsch. Damit sind Hochdurchsatz-Analysen und Automation problemlos möglich.

Schmelzkurvenanalyse

Mit der Schmelzukurvenanalyse (High Resultion Melting Curve Analysis – HRM) lassen sich kleinste Änderungen im Genom wie z.B. SNP und Mutationen einfach mittels qPCR nachweisen.

Matsuda, K. (2017). PCR-Based Detection Methods for Single-Nucleotide Polymorphism or Mutation: Real-Time PCR and Its Substantial Contribution Toward Technological Refinement. Advances in Clinical Chemistry, 80, 45–72. https://doi.org/10.1016/bs.acc.2016.11.002

Simko, I. (2016). High-Resolution DNA Melting Analysis in Plant Research. Trends in Plant Science, 21(6), 528–537. https://doi.org/10.1016/j.tplants.2016.01.004

Mohammad Rahimi, H., Pourhosseingholi, M. A., Yadegar, A., Mirjalali, H., & Zali, M. R. (2019). High-resolution melt curve analysis: A real-time based multipurpose approach for diagnosis and epidemiological investigations of parasitic infections. Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases, 67, 101364. https://doi.org/10.1016/j.cimid.2019.101364

Features .

Für alle qPCR Cycler .

Unsere qPCR 2x Master Mixe sind für alle gängigen qPCR-Cycler geeignet und wahlweise mit oder ohne ROX lieferbar.

Ob Ihr Gerät zur Normalisierung ROX (6-Carboxy- X-rhodamine) verwendet haben wir für Sie in einer Tabelle zusammengestellt.

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Hersteller	qPCR Gerät	ROX notwendig?
Applied Biosystems / Thermo Fischer	StepOne™ Real-Time PCR System	Ja (high ROX)
	StepOnePlus™ Real-Time PCR System	Ja (high ROX)
	7500 Real-Time PCR System	Ja
	7500 Fast Real-Time PCR System	Ja
	7500 Fast Dx Real-Time PCR Instrument	Ja
	7500 Real-Time PCR System for Human Identification	Ja
	7300 Real-Time PCR System	Ja (high ROX)
	Viia™ 7 Real-Time PCR System	Ja
	7900HT Fast Real-Time PCR System	Ja (high ROX)
	OpenArray® Real-Time PCR Platform	Ja (high ROX)
	PRISM® 7000 Sequencing Detection System	Ja (high ROX)
	PRISM® 7700 Sequencing Detection System	Ja (high ROX)
	PRISM® 7900 Sequencing Detection System	Ja (high ROX)
	Gene Amp 5700	Ja (high ROX)
	Quantstudio™ 3 / 3 FAST	Ja
	Quantstudio™ 5 / 5 FAST	Ja
	Quantstudio™ 6	Ja
	Quantstudio™ 7	Ja
	Quantstudio™ 12	Ja
	QuantStudio™ 12K Flex system	Ja
Bioneer	Exicycler™96	Nein (optional)
	Exicycler™384	Nein (optional)
Biorad	CFX96™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	CFX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	CFX384 Touch™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	CFX Opus 96 Real-Time PCR System	Nein
	CFX Opus 384 Real-Time PCR System	Nein
	CFX Connect™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	iQ5 Real-Time PCR Detection System	Nein
	MiniOpticon™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	Opticon 2 – Continuous Fluorescence Detection System	Nein
	Chromo4™ Four-Color Real-Time Detector	Nein
Bioron	RealLine Cycler 48-4	Nein (optional)
	RealLine Cycler 48-5	Nein (optional)
	RealLine Cycler 96-4	Nein (optional)
	RealLine Cycler 96-5	Nein (optional)
DNA Technology	Dtlite	Nein (optional)
	Dtprime	Nein (optional)
Eppendorf	Mastercycler® ep realplex 4, Real-Time Thermal Cycler	Nein
	Mastercycler® ep realplex 4s, Real-Time Thermal Cycler	Nein
	Mastercycler® ep realplex, Real-Time Thermal Cycler	Nein
	Mastercycler® ep realplex s, Real-Time Thermal Cycler	Nein
	Mastercycler Nexus	Nein
	Mastercycler Nexus gradient	Nein
	Mastercycler Pro	Nein
	Mastercycler Pro S	Nein
	Mastercycler Pro 384	Nein
Roche	LightCycler® 96 System	Nein
	LightCycler® 480 System	Nein
	LightCycler® 2.0 Instrument	Nein
	LightCycler® 1.5 Instrument	Nein
	LightCycler® 1536 System	Nein
	LightCycler® Nano System	Nein
Analytik Jena	qTower	Ja
	qTower 2.0	Ja
	qTower 2.2	Ja
	qTower 3	Ja
	qTower 3 84	Ja
Stratagene / Agilent	AriaMx Real-time PCR System	Nein
	Mx3000P® qPCR System	Ja
	Mx3005P® qPCR System	Ja
	Mx4000® qPCR System	Ja
Qiagen	Rotor-Gene™ Q	Ja
	Rotor-Gene™ 6000	Ja
Quantabio	Q	Nein (optional)

RT-qPCR in unter 35 Minuten .

In den primaQUANT 1STEP RT-qPCR Master Mixen kombinieren wir optimierte Reverse Transkriptasen mit einer extrem schnellen DNA-Polymerase. Damit kann eine komplette RT-qPCR (Umschreibung von RNA in cDNA und anschließende qPCR) je nach qPCR-Gerät in weniger als 35 Minuten durchgeführt werden.

Damit sparen Sie insbesondere bei der Diagnostik oder größeren Probenzahlen wertvolle Zeit und Kapazität.

Selbstverständlich können Sie aber auch Ihr bisheriges RT-qPCR Protokoll weiterhin verwenden.

Mit dem primaQUANT 1STEP RT-qPCR Mastermix können Sie eine RT-qPCR in weniger als 35 Minuten durchführen.

Direkte Analyse von RNA mit sehr hoher Sensitivität .

Die primaQUANT 1STEP RT-qPCR Master Mixe sind sehr sensitiv und zeigen eine weite Linear Dynamic Range.

Das Produkt ist damit speziell für die Diagnostik sehr interessant, wo Schnelligkeit und Sensitivität besonders wichtig sind.

Stabil auch bei Raumtemperatur .

Einfrieren/Auftauen

Unserem primaQUANT 1STEP Master Mix kann auch mehrfaches Einfrieren/Auftauen nichts anhaben. Sie können die Mixe daher problemlos mehr als 10x Einfrieren und wieder auftauen.

Lagerung im Kühlschrank

Die primaQUANT 1 STEP Master Mixe sind über Wochen bei 4°C stabil. Für kurzzeitige Lagerung empfehlen wir daher generell die Aufbewahrung bei 4°C im Kühlschrank.

Stabilität bei Raumtemperatur

Wir haben unsere Master Mixe so optimiert, dass sie auch mehrere Tage ohne Kühlung schadlos überstehen. Sie müssen Ihre RT-qPCR daher nicht mehr aufwändig auf Eis pipettieren, um einen Sensitivitätsverlust zu vermeiden. Damit eignet sich der primaQUANT 1STEP auch perfekt für Automationslösungen, da keine Kühlung erforderlich ist.

Der primaQUANT 1STEP RT-qPCR Master Mix ist mehrere Wochen bei 4°C stabil und kann daher für die schnellere Verwendbarkeit im Kühlschrank gelagert werden.

Die primaQUANT 1STEP RT-qPCR Master Mixe sind so entwickelt worden, dass diese auch bei Raumtemperatur einer ausgezeichnet Stabilität besitzen. SIe müssen nicht auf Eis pipettieren und können die Mixe sehr gut in Automationslösungen verwenden.

Durch die besondere Formulierung des primaQUANT 1STEP Master Mixes bleibt die Performance auch nach 10 Einfrier/Auftau-Vorgängen stabil.

Praktische Abfüllung .

Kein lästiges Aliquotieren mehr!

Unsere Master Mixe kommen standardmäßig in Einheiten von 1 ml.

Das ist sehr komfortabel und praktisch, denn ein Tube reicht für genau eine 96er Platte, zwei Tubes für eine 384er Platte. Sollten Sie einmal weniger benötigen, können Sie die Mixe einfach im Kühlschrank über mehrere Wochen lagern.

Kundenspezifische Abfüllungen: Als Hersteller können wir Ihnen selbstverständlich bei größeren Bestellungen auch Abfüllungen und Mixturen entsprechend Ihren speziellen Erfordernissen liefern.

Einfärbung für optimiertes Handling .

Der primaQUANT 1STEP Master Mix ist für ein besseres Handling blau eingefärbt. Damit wird das Pipettieren viel komfortabler und auch wesentlich sicherer: Sie erkennen sofort, ob bei einem Ansatz schon Mastermix zugegeben wurde und welche Wells bereits pipettiert sind oder evt. vergessen wurden.

Der verwendete blaue Farbstoff hat keinen messbaren nachteiligen Effekt auf die RT-qPCR .

Made in Germany .

Unsere Enzyme und Master Mixe entwickeln und produzieren wir ausschließlich selbst in Deutschland. Davon profitieren Sie gleich mehrfach:

primaQUANT RT-qPCR Master Mixe mit SYBR® Green .

Erhältlich mit ROX oder ohne ROX – passend für alle qPCR Geräte.

SL-9551

2x 1-Step RT-qPCR SYBR® Green Master Mix

Muster anfragen

SL-9551R

2x 1-Step RT-qPCR SYBR® Green Master Mix, ROX

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Downloads .

Manuals

Flyer

ROX Kompatbilitätsliste

Protokoll

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ROX Kompatbilitätsliste

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Hersteller	qPCR Gerät	ROX notwendig?
Applied Biosystems / Thermo Fischer	StepOne™ Real-Time PCR System	Ja (high ROX)
	StepOnePlus™ Real-Time PCR System	Ja (high ROX)
	7500 Real-Time PCR System	Ja
	7500 Fast Real-Time PCR System	Ja
	7500 Fast Dx Real-Time PCR Instrument	Ja
	7500 Real-Time PCR System for Human Identification	Ja
	7300 Real-Time PCR System	Ja (high ROX)
	Viia™ 7 Real-Time PCR System	Ja
	7900HT Fast Real-Time PCR System	Ja (high ROX)
	OpenArray® Real-Time PCR Platform	Ja (high ROX)
	PRISM® 7000 Sequencing Detection System	Ja (high ROX)
	PRISM® 7700 Sequencing Detection System	Ja (high ROX)
	PRISM® 7900 Sequencing Detection System	Ja (high ROX)
	Gene Amp 5700	Ja (high ROX)
	Quantstudio™ 3 / 3 FAST	Ja
	Quantstudio™ 5 / 5 FAST	Ja
	Quantstudio™ 6	Ja
	Quantstudio™ 7	Ja
	Quantstudio™ 12	Ja
	QuantStudio™ 12K Flex system	Ja
Bioneer	Exicycler™96	Nein (optional)
	Exicycler™384	Nein (optional)
Biorad	CFX96™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	CFX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	CFX384 Touch™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	CFX Opus 96 Real-Time PCR System	Nein
	CFX Opus 384 Real-Time PCR System	Nein
	CFX Connect™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	iQ5 Real-Time PCR Detection System	Nein
	MiniOpticon™ Real-Time PCR Detection System	Nein
	Opticon 2 – Continuous Fluorescence Detection System	Nein
	Chromo4™ Four-Color Real-Time Detector	Nein
Bioron	RealLine Cycler 48-4	Nein (optional)
	RealLine Cycler 48-5	Nein (optional)
	RealLine Cycler 96-4	Nein (optional)
	RealLine Cycler 96-5	Nein (optional)
DNA Technology	Dtlite	Nein (optional)
	Dtprime	Nein (optional)
Eppendorf	Mastercycler® ep realplex 4, Real-Time Thermal Cycler	Nein
	Mastercycler® ep realplex 4s, Real-Time Thermal Cycler	Nein
	Mastercycler® ep realplex, Real-Time Thermal Cycler	Nein
	Mastercycler® ep realplex s, Real-Time Thermal Cycler	Nein
	Mastercycler Nexus	Nein
	Mastercycler Nexus gradient	Nein
	Mastercycler Pro	Nein
	Mastercycler Pro S	Nein
	Mastercycler Pro 384	Nein
Roche	LightCycler® 96 System	Nein
	LightCycler® 480 System	Nein
	LightCycler® 2.0 Instrument	Nein
	LightCycler® 1.5 Instrument	Nein
	LightCycler® 1536 System	Nein
	LightCycler® Nano System	Nein
Analytik Jena	qTower	Ja
	qTower 2.0	Ja
	qTower 2.2	Ja
	qTower 3	Ja
	qTower 3 84	Ja
Stratagene / Agilent	AriaMx Real-time PCR System	Nein
	Mx3000P® qPCR System	Ja
	Mx3005P® qPCR System	Ja
	Mx4000® qPCR System	Ja
Qiagen	Rotor-Gene™ Q	Ja
	Rotor-Gene™ 6000	Ja
Quantabio	Q	Nein (optional)

Protokoll

Zusammensetzung

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Komponente	Stock Konzentration	20 µl Reaktion	10 µl Reaktion	Finale Konzentration
primaQUANT 1STEP Master Mix	2x	10 µl	5 µl	1 x
Forward Primer	8 µM	1 µl	0,5 µl	400 nm (100 – 600 nM empfohlen)
Reverse Primer	8 µM	1 µl	0,5 µl	400 nM (100 – 600 nM empfohlen)
Probe / Sonde	8 µM	1 µl	0,5 µl	400 nM (100 – 600 nM empfohlen)
Template RNA	10 ng/µl	2 µl	1 µl	0,1 – 100 ng/Reaktion
Steriles Wasser	–	5 µl	2,5 µl	–

Standard Protokoll

3-Step

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	Schritt	Zeit	Temperatur
Reverse Transkription		10 Minuten	50°C
Initiale Denaturierung		3 Minuten	92°C – 95°C
25 – 45 Zyklen	Denaturierung	5 Sekunden	92°C – 95°C
	Annealing	5 Sekunden	60°C – abhängig von den verwendeten Primern
	Extension	5-10 Sekunden	72°C

2-Step

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	Schritt	Zeit	Temperatur
Reverse Transkription		10 Minuten	50 °C
Initiale Denaturierung		3 Minuten	92 °C – 95°C
25 – 45 Zyklen	Denaturierung	5 Sekunden	92 °C – 95°C
	Kombiniertes Annealing/Extension	10 Sekunden	60 °C – abhängig von den verwendeten Primern

Ultra-FAST Protokoll

3-Step

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	Schritt	Zeit	Temperatur
Reverse Transkription		5 Minuten	50°C
Initiale Denaturierung		60 Sekunden	92°C – 95°C
25 – 45 Zyklen	Denaturierung	1 Sekunde	92°C – 95°C
	Annealing	1 Sekunde	60°C – abhängig von den verwendeten Primern
	Elongation	1-5 Sekunden	72°C

2-Step

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	Schritt	Zeit	Temperatur
Reverse Transkription		5 Minuten	50 °C
Initiale Denaturierung		60 Sekunden	92°C – 95°C
25 – 45 Zyklen	Denaturierung	1 Sekunde	92°C – 95°C
	Kombiniertes Annealing/Elongation	1-5 Sekunden	60°C – abhängig von den verwendeten Primern

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Steinbrenner Laborsysteme GmbH

Reverse Transkription und qPCR mit SYBR® Green .

Hard Facts .

Anwendungen .

Features .

Für alle qPCR Cycler .

RT-qPCR in unter 35 Minuten .

Direkte Analyse von RNA mit sehr hoher Sensitivität .

Stabil auch bei Raumtemperatur .

Praktische Abfüllung .

Einfärbung für optimiertes Handling .

Made in Germany .

primaQUANT RT-qPCR Master Mixe mit SYBR® Green .

2x 1-Step RT-qPCR SYBR® Green Master Mix

2x 1-Step RT-qPCR SYBR® Green Master Mix, ROX

Downloads .

primaQUANT 1STEP CYBR – SL-9551 – Manual 183.46 KB

primaQUANT 1STEP CYBR – SL-9551R – Manual 183.46 KB

primaQUANT 1STEP – RT-qPCR Master Mixe – Flyer 1.64 MB

Zusammensetzung

Standard Protokoll

3-Step

2-Step

Ultra-FAST Protokoll

3-Step

2-Step